Microbiologische methoden voor studie van water, bodem en lucht

Micro-organismen - kleine, meestal eencellige wezens, die op grote schaal in de natuur zijn. Ze zijn te vinden in alle media (lucht, bodem, water) bij mensen en dieren, in planten.

Kwalitatieve diversiteit en het aantal organismen eerste plaats afhangen van de voedingswaarde verbindingen. Maar het is ook belangrijk als vochtigheid, temperatuur, ventilatie en de actie van zonlicht en andere factoren.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Werkwijzen voor sanitair en microbiologisch onderzoek natuurlijke media kan de aanwezigheid van pathogenen te detecteren en de omvang ervan volgens de verkregen resultaten bepalen maatregelen te verwijderen of te voorkomen infectieziekten. Daarnaast is kwantitatief verslag nodig is voor de modellering van ecosystemen en de ontwikkeling van de natuurlijke processen van het bestuur. . Laat ons verder overwegen wat zijn de methoden van microbiologisch onderzoek.

bodem

Het wordt door geleerden als één van de mogelijke routes van overdracht van besmettelijke ziekten. Met afscheiding menselijke of dierlijke patiënt in de bodem doordringen ziekteverwekkers. Sommigen van hen, in het bijzonder, spore, kunnen aanhouden in de bodem voor een lange tijd (soms tientallen jaren). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). De grond val ziekteverwekkers zoals gevaarlijke infecties zoals tetanus, miltvuur, botulisme, enzovoort. Methoden van sanitaire-microbiologische onderzoek van de bodem kunt u "kiemgetal" (het aantal micro-organismen in de bodem van een gram) en coli-index (het aantal E. coli) te definiëren .

Bodemonderzoek: een overzicht

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Methoden voor microbiologisch onderzoek van de bodem moet in de eerste plaats worden toegeschreven directe microscopie en cultuur op vaste voedingsbodem. Populaties van micro-organismen en groepen die de grond bewonen, verschillen de taxonomische status en ecologische functies. In de wetenschap, worden ze verenigd onder de generieke term "bodemleven." Primer - leefgebied groot aantal micro-organismen. In gram grond aanwezig 1-10 miljard aan hun cellen. In deze omgeving, neemt actief afbraak van organisch materiaal, met de onderscheiden saprofytische micro-organismen.

Microscopische studies van microbiologische methode: de stappen

Analyse van het medium begint met sampling. Daartoe vooraf geschild en geraspt alcohol mes (schep kan worden gebruikt). Daarna is het monster voorbereiding. De volgende stap - tellen cellen gekleurd uitstrijkjes. Denk aan elke stap afzonderlijk.

monsterneming

Bij de analyse van landbouwgronden neiging monster van een diepte van de gehele laag. Eerst verwijderd 2-3 cm boven de grond, zoals aanwezig in een vreemde microflora kan zijn. Daarna, met een oppervlakte van de grond onderzocht nemen monolieten. De lengte van elk van hen moet voldoen aan de dikte van de laag waaruit u wilt proeven.

Op een perceel van 100-200 vierkante. 7-10 m geselecteerde monsters. Het gewicht van elk - van de orde van 0,5 kg. De monsters moeten grondig in de zak worden gemengd. neem dan het gemiddelde monster van ongeveer 1 kg. Moet in perkament (steriele) verpakking ingesloten in een stoffen zak worden geplaatst. Voorafgaand aan directe analyse van de in de koelkast bewaard monster.

Survey Voorbereiding

Het geroerde grond gegoten op een droge ruit. De pre-veeg met alcohol en branden boven de brander. Met een spatel bodem grondig gemengd en gelijkmatig uitgebreid. Is het verplicht om de wortels en andere vreemde elementen te verwijderen. Om dit te doen, gebruik maken van een pincet. Voor de operatie pincet en spatel boven de brander ontstoken en laat afkoelen.

Van de verschillende bodem percelen verdeeld op het glas, geselecteerde kleine porties. Ze woog in een porseleinen schaal op technische schaal. является специальная обработка образца. Verplichte stap microscopische methode microbiologische studies is de speciale verwerking van het monster. 2 moeten worden voorbereid, steriele kolf. Hun grootte mag niet meer dan 250 ml. Één van de kolven wordt in 100 ml leidingwater uitgegoten. Omdat het 0,4-0,8 ml vloeistofmonster grond en bevochtigd tot een pasta. Het mengsel moet worden gewreven met een vinger of rubber stamper gedurende 5 minuten.

Water uit de eerste kolf werd overgebracht in grondmassief gewogen lege fles. Verder wrijven haar rug. Nadat deze massa wordt overgebracht in een kolf bij de brandervlam. Container met bodem suspensie werd geschud op een schudder gedurende 5 minuten. Daarna liet men gedurende ongeveer 30 seconden. Dit is noodzakelijk zodat grote deeltjes bezinken. Na een halve minuut massa wordt gebruikt voor het bereiden van het preparaat.

Cell rekent op gefixeerde uitstrijkjes

, разработанному Виноградским. Direct microscopisch onderzoek van de bodem wordt uitgevoerd volgens de methode van microbiologisch onderzoek, ontwikkeld Vinogradskii uitgevoerd. In bepaalde volume van de suspensie werd geteld aantal cellen van micro-organismen. Bestuderen gefixeerde uitstrijkjes kunnen geneesmiddelen bewaren op lange termijn en berekeningen uitvoeren op elk moment.

Bereiding van het geneesmiddel als volgt. Een bepaalde hoeveelheid slurry (gewoonlijk 0,02-0,05 ml) wordt met een micropipet op het glaasje. Aan deze oplossing werd een druppel agar-agar werd toegevoegd (polysaccharide agaropectine mengsel en agarose geëxtraheerd uit bruine en rode algen Zwarte Zee), snel geroerd en verspreid over een gebied 4-6 sq. cm. Pap lucht gedroogd en gedurende 20-30 minuten gefixeerd. alcohol (96%). Vervolgens worden de geneesmiddel bevochtigd met gedestilleerd water en in de p-p carbolhoudende erythrosine 20-30 min.

Na het kleuren wordt gewassen en aan de lucht gedroogd. Cel tellingen uitgevoerd vanaf de onderdompeling lens.

Zaaien op vaste media

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Microscopische methoden voor microbiologisch onderzoek kan een groot aantal micro-organismen te detecteren. Maar ondanks dit, de methode van inenting is de meest voorkomende in de praktijk. De essentie bestaat uit het zaaien hoeveelheid van het geneesmiddel (bodem schorsing) in een petrischaal op een vast medium.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Deze methode van microbiologisch onderzoek wordt rekening gehouden met niet alleen de kwantiteit, maar ook de groep, en in sommige gevallen, en de soortensamenstelling van de microscopische flora. Het tellen van het aantal kolonies gevormd, meestal van de bodem van de petrischaal in doorgelaten licht. Op de berekende wijk op een merker of inktstippenteller.

wateranalyse

De microflora van het waterlichaam, in de regel, weerspiegelt de microbiële samenstelling van de grond er omheen. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. In deze context, methoden van sanitaire-microbiologische analyse van water en bodem zijn van bijzonder praktisch belang in de studie van de toestand van een bepaald ecosysteem. Het zoete water bevat als regel, kokken, staafvormige bacterie.

Anaerobe bacteriën in het water gevonden in kleine hoeveelheden. In de regel, ze vermenigvuldigen op de bodem van lichamen van water, in de modder, die deelnemen aan het proces van zuivering. Microflora zeeën en zeeën met voordeel gerepresenteerd halophytic (halophilic) bacteriën.

In het water, geboorde putten praktisch geen micro-organismen. Dit komt door de filtercapaciteit van de grondlaag.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Conventionele methoden voor microbiologische water onderzoek beschouwd als de definitie van microbiële en coli-titer of-index. De eerste indicator definieert het aantal bacteriën in 1 ml vloeistof. Coli index geeft het aantal coliformen aanwezig in een liter water, en indien titer - het minimumaantal of maximum verdunning vloeistof waarin ze nog steeds kunnen worden gedetecteerd.

Bepaling van microbiële nummer

Deze methode sanitaire microbiologisch onderzoek van het water is als volgt. In 1 ml water wordt bepaald aantal mesofiele en facultatieve anaëroben (tussenproduct) aërobe staat vlees-pepton agar (primair medium) bij 37 graden. overdag koloniën zichtbaar bij een vergroting van 2,5 p te vormen. of het blote oog.

является посев. De belangrijkste stap van de werkwijze voor microbiologische analyse van water wordt gezaaid. Omdat elk monster gezaaid tenminste 2 verschillende volumes. Wanneer leidingwater analyse van elke beker vervaardigd uit 1-0,1 ml zuivere vloeistof en verontreinigde 0,01-0,001 ml. Voor inoculatie van 0,1 ml of kleiner vloeistofvolume wordt verdund met gedestilleerd (steriel) water. Consequent decimale verdunningen. 1 ml van elk van hen in twee petrischalen.

Fokken gevuld met voedingsagar. Om te beginnen moet smelten en laat afkoelen tot 45 graden. Na roeren wordt het actieve medium achtergelaten op een horizontaal oppervlak te stollen. Bij 37 graden. gewassen worden geteeld gedurende de dag. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. De beschouwde methode microbiologisch water onderzoek houdt rekening met de resultaten van die gerechten waar het aantal kolonies in het bereik van 30 tot 300.

lucht

Het wordt beschouwd als een transit grond voor micro-organismen. являются седиментация (оседание) и аспирация. De belangrijkste methoden voor microbiologische studies zijn voorzien van sedimentatie (bezinking) en aspiratie.

Microflora luchtmilieu is willekeurig verdeeld in variabele en constante. De eerste groep omvat gist, chromogene cocci, spore-dragende bacillus coli of andere micro-organismen die resistent zijn tegen drogen, blootstelling aan licht. Vertegenwoordigers variabele microflora, doordringen in de lucht door hun gebruikelijke habitat, lange behouden hun vitaliteit.

In de lucht van de grote steden micro- organismen veel meer dan in de lucht omgeving van het platteland. Over de zeeën, bossen zijn zeer weinig bacteriën. Luchtzuivering vergemakkelijken neerslag: sneeuw en regen. Binnen microben veel meer dan in de open ruimte. Hun aantal is toegenomen in de winter in de afwezigheid van reguliere ventilatie.

sedimentatie

считается простейшим. Deze methode van microbiologisch onderzoek in de microbiologie wordt beschouwd als de eenvoudigste. Het is gebaseerd op bezinken van de druppeltjes en deeltjes op het agar-oppervlak in een open petrischaal onder zwaartekracht. sedimentatie methode niet altijd nauwkeurig het aantal bacteriën in de lucht te bepalen. Het feit is dat in een open kom om de fijne fractie van de stofdeeltjes en druppeltjes van bacteriële heel moeilijk te vangen. Oppervlakkig vastgehouden hoofdzakelijk grote deeltjes.

Deze werkwijze is niet gebruikt voor luchtanalyse. Deze omgeving gekenmerkt door grote fluctuaties in de snelheid van de luchtstroom. Sedimentatie kunnen echter worden toegepast bij gebrek aan meer geavanceerde apparaten en elektrische voedingsbron.

Bepalen van het aantal microbiële uitgevoerd door Omelyansky methode. In overeenstemming daarmee, gedurende 5 minuten op een oppervlakte van 100 vierkante agar. cm regelt een aantal bacteriën in 10 liter lucht.

Bestel 535 "Op de eenwording van microbiologische methoden van onderzoek"

Bacteriologisch onderzoek neemt een belangrijke plaats in de complexe klinische en laboratorium activiteiten die gericht zijn op de diagnose, preventie en behandeling van verschillende infectieziekten. Echter, de studie van het milieu, ze zijn niet beperkt.

Van bijzonder belang is de bacteriologische analyse van biologisch materiaal in ziekenhuizen. Voor onderzoek uitgevoerd in medische instellingen, verhoogde eisen. Het doel van de Orde "Op de eenwording van microbiologische methoden van onderzoek" is het de bacteriologische analyse te verbeteren, het verbeteren van de kwaliteit en efficiëntie van de microbiologische diagnostiek.

Microscopisch onderzoek van uitstrijkjes bij vrouwen

Het is een belangrijk analysemethode voor de diagnose van infecties, seksueel overdraagbare infecties, en opportunistische infecties (opportunistische bacteriën).

Microscopische analyse om de kwalitatieve en kwantitatieve samenstelling van de microflora te evalueren, controleer de juistheid van de bemonstering. Bijvoorbeeld, de aanwezigheid van het vaginale epitheel in schraapsel van de baarmoederhals wijst op een overtreding van de regels voor de selectie van een biologisch monster.

Er wordt gezegd dat in het microbiologisch onderzoek van deze zaak, in het algemeen gepaard met bepaalde problemen. Zij hebben betrekking op het feit dat de lagere genitale tractus gewoonlijk een divers microflora die varieert op verschillende leeftijden presenteren. Om de efficiëntie van het onderzoek te verbeteren en hebben gestandaardiseerde regels ontwikkeld.

Diagnose van virale infecties

Zij worden door de werkwijzen het detecteren van RNA en DNA pathogenen uitgevoerd. Ze zijn voornamelijk gebaseerd op de bepaling van nucleotidesequenties in pathologisch materiaal. Daartoe de sondemoleculen. Zij kunstmatig nucleïnezuren die complementair zijn aan (complementair aan) de virale zuren gemerkt met een radioactieve label of biotine.

De bijzonderheid van de werkwijze herhaald kopiëren van het specifieke DNA fragment dat enkele honderden (of tientallen) nucleotide paren. replicatie (kopiëren) is deze verlenging kan beginnen slechts in bepaalde eenheden. primers (primers) gebruikt om ze te maken. Ze zijn gesynthetiseerde oligonucleotiden.

PCR diagnostiek (polymerasekettingreactie) een eenvoudige uitvoering. Met deze methode kunt u het resultaat snel met behulp van een kleine hoeveelheid pathologisch materiaal. Middels PCR diagnostiek identificeert acute, chronische en latente (verborgen) infecties.

Als de gevoeligheid van deze methode wordt meer de voorkeur. Echter, de huidige testsystemen zijn niet betrouwbaar genoeg, dus de PCR diagnose traditionele methoden niet volledig kan vervangen.