Serologische tests: types, gebruik

Laboratoriumdiagnose van vrijwel alle infecties is gebaseerd op de detectie van antilichamen in bloed van de patiënt, die worden geproduceerd door de pathogeen antigen, serologische werkwijzen. Ze gingen in de medische praktijk in de late negentiende - begin twintigste eeuw.

De ontwikkeling van de wetenschap heeft bijgedragen tot de antigene structuur van microben en chemische formules van hun giftige stoffen te bepalen. Het is mogelijk om niet alleen therapeutisch, maar ook diagnostische serum te creëren. Zij worden verkregen door toediening verzwakte pathogenen laboratoriumdieren. Na enkele dagen weken bloed konijnen of muizen bereide producten gebruikt voor de identificatie van bacteriën of toxinen met behulp serologische tests.

De uiterlijke verschijningsvorm van deze reactie hangt af van de omstandigheden van de formulering en de stand van antigenen in bloed van de patiënt. Als microben onoplosbare deeltjes, zij bezinken, gelyseerd, geïmmobiliseerd of gebonden in serum. Indien de antigenen oplosbaar zijn, lijkt het fenomeen van neutralisatie of precipitatie.

agglutinatie (PA)

Serumagglutinatietests test is zeer specifiek. Het is gemakkelijk uit te voeren en het is heel duidelijk om snel de aanwezigheid van antigenen te detecteren in serum van een patiënt. Het wordt gebruikt voor het instellen Vidal reactie (diagnose van tyfus en paratyfus) en Weigl (tyfus).

Het is gebaseerd op een specifieke interactie tussen menselijke antilichamen (of agglutinine) en microbiële cellen (agglyutenogenami). Na hun interactie ontstaan deeltjes die neerslaan. Dit is een positief teken. Instelling reactie kan worden gebruikt levend of dood microbiële middelen, schimmels, protozoa, bloedcellen en somatische cellen.

Chemische reactie wordt verdeeld in twee fasen:

1. Specifieke antilichamen verbinding (AT) met antigenen (Ag).
2. Niet-specifieke - de afzetting van conglomeraten AG-AT, dat wil zeggen de vorming van het agglutineren.

Reactie indirecte agglutinatie (TPHA)

Deze reactie is gevoeliger dan de vorige. Het wordt gebruikt voor de diagnose van ziekten die worden veroorzaakt door bacteriën, intracellulaire parasieten, protozoa. Het is zo bepaald dat zelfs zeer lage concentraties antilichamen kunnen detecteren.

Voor de formulering met gebruikmaking van gezuiverd schapen rode bloedcellen en rode bloedcellen van menselijke voorbehandeld met antilichamen of antigenen (het hangt af van wat lab wil te vinden). In sommige gevallen, menselijke rode bloedcellen behandeld met immunoglobulinen. Serologische respons erytrocyten wordt geacht geldig indien precipitatie daarvan trad op bij de bodem van de buis. De positieve reactie kunnen we zeggen wanneer de cellen zijn gerangschikt in de vorm van een omgekeerde paraplu, bezetten de gehele bodem. De negatieve reactie wordt gescoord als de rode bloedcellen vestigen in de vorm van een kolom of knoppen in het midden van de bodem.

neerslagreactie (RP)

Serologische reacties van dit type dienen om zeer kleine deeltjes antigenen te identificeren. Dit kan, bijvoorbeeld eiwitten (of gedeelten daarvan), verbindingen met eiwitten met lipiden of koolhydraten, een deel van de bacteriën en hun toxinen.

Sera voor de reactie wordt verkregen door kunstmatige besmetting van dieren, gewoonlijk konijnen. Bij deze methode, kunt u absoluut get any neerslaan serum. Staging serologische precipitatie soortgelijk werkingsmechanisme op agglutinatie. De antilichamen in het serum binden aan antigenen in de colloïdale oplossing te grote eiwitmoleculen, die op de bodem van de buis of op het substraat (gel) zijn aangebracht vormen. Deze methode wordt beschouwd als zeer specifiek te zijn en kan zelfs hoeveelheden van de stof kan worden opgespoord traceren.

Wordt gebruikt om pest, tularemie, diagnosticeren miltvuur, meningitis en andere ziekten. Ook betrokken bij het forensisch onderzoek.

Gel Neerslag

Serologische testen kunnen niet alleen in een vloeibaar medium, maar in de agarosegel worden uitgevoerd. Dit diffuse precipitatiewerkwijze genoemd. Hiermee bestuderen de samenstelling van complexe antigene mengsels. Deze methode is gebaseerd op de chemotaxis van antigenen om antilichamen en vice versa. De gel ze naar elkaar toe bewegen met verschillende snelheden en vergadering precipitatielijnen gevormd. Elke lijn - een set van K-AT.

Neutralisatie exotoxine antitoxine (RN)

Antitoxic serum kan exotoxine welke micro-organismen produceren neutraliseren. Op basis van deze gegevens en serologisch onderzoek. Microbiology gebruikt deze werkwijze voor de titratie van sera, toxinen en toxoïden, evenals hun therapeutische activiteit. De sterkte van het neutraliseren van het toxine wordt bepaald door de gebruikelijke eenheden - AE.

Bovendien, als gevolg van deze reactie kunnen de soorten of behorend exotoxine bepalen. Het wordt gebruikt bij de diagnose van tetanus, difterie, botulisme. Het onderzoek kan worden uitgevoerd "op het glas", en in een gel.

lysis reactie (RL)

Het immuunserum, dat het lichaam binnenkomt van de patiënt, heeft naast zijn hoofdfunctie van passieve immuniteit, zelfs en lytische eigenschappen. Het kan oplossen microbiële agentia, cellulaire en vreemde elementen virus in het lichaam van de patiënt. Afhankelijk van de specificiteit van de antilichamen in het serum geïsoleerd bactericidin, cytolysinen, spirohetoliziny, hemolysine en andere.

Deze specifieke antilichamen worden "complement" genoemd. Het wordt gevonden in vrijwel alle lichaamsvloeistoffen, heeft een complexe eiwitstructuur en is zeer gevoelig voor temperatuurstijging, geschud, zuren en direct zonlicht. Maar in de gedroogde toestand in staat is om hun lytische eigenschappen te behouden van maximaal zes maanden.

Er zijn een aantal soorten van serologische tests van dit type:

- bacteriolysis;

- hemolyse.

Bacteriolyse wordt uitgevoerd met behulp van bloedserum van de patiënt en de specifieke immuun serum met levende bacteriën. Als dus de onderzoeker ziet de lysis van de bacteriën, en het antwoord zal worden beschouwd als een voldoende aantal positieve complement in het bloed aanwezig is.

De tweede bloed serologische respons is dat de suspensie van erytrocyten behandelde patiënt serum dat hemolysinen, die worden geactiveerd in de aanwezigheid van een bepaalde compliment. Als er één, dan is het lab kijken naar de ontbinding van rode bloedcellen. Deze reactie wordt veel gebruikt in de moderne geneeskunde om de titer te bepalen van complement (dat wil zeggen, de kleinste hoeveelheid veroorzakend lysis van rode bloedcellen) in het bloedserum en voor de productie van complement bindingstest. Het op deze wijze uitgevoerde serologische reactie voor syfilis - Wasserman.

complement fixatie (RSK)

Deze reactie wordt gebruikt serum antilichamen aan de patiënt van een infectieus agens en de initiator van de antigene structuur identificeren.

Tot op dit punt hebben we beschreven een eenvoudige serologische tests. RAC reactie als moeilijk, omdat geen twee maar drie elementen samenwerken: een antilichaam, een antigeen en complement. De essentie ligt in het feit dat de interactie tussen het antilichaam en antigeen komt slechts in de aanwezigheid van eiwitten complimenteren die geadsorbeerd op het oppervlak van het gevormde complex K-AT.

Zelf antigenen na toevoeging van complement, met wezenlijke veranderingen, die de kwaliteit van de reactie te geven. Dit kan lysis, hemolyse, immobilisatie, bactericide of bacteriostatisch effect.

De reactie zelf vindt plaats in twee fasen:

1. De vorming van antilichaam-antigeen, die niet visueel waarneembaar onderzoeker.
2. Het veranderen van het antigeen onder de werking van complement. Deze fase meestal kan worden herleid tot het blote oog. Als de visuele reactie niet zichtbaar is, gebruik dan de extra indicator systeem dat het mogelijk maakt om veranderingen te detecteren.

indicator systeem

Deze reactie is gebaseerd op de binding van complement. De reageerbuizen uur nadat RSK toegevoegd gezuiverd schapen erythrocyten en serum hemolytische complement bevatten. Indien de buis gebonden complement werd gelaten, zal het lid van de complexe N-AT gevormd tussen de schapen bloedcellen en hemolysine en de ontbinding zijn. Dit zou betekenen dat de DGC negatief is. Indien rode bloedcellen intact gebleven, dan derhalve de reactie positief.

hemagglutinatie (RHA)

Er zijn twee fundamenteel verschillende hemagglutinatie. Een van hen - serologische, wordt het gebruikt voor het bepalen van bloedgroepen. In dit geval erytrocyten interactie met antilichamen.

En de tweede reactie niet gerelateerd aan serologische omdat rode bloedcellen reageren met hemagglutinine door virussen. Aangezien elke bekrachtiger alleen inwerkt op bepaalde erytrocyten (kip, schaap, aap), kunnen we aannemen deze reactie eng specifiek.

Duidelijke positieve of negatieve reactie, is het mogelijk de locatie van de bloedcellen op de bodem van de buis. Als ze figuur lijkt op een omgekeerde paraplu, dan is het gewenste virus in het bloed van de patiënt. En als alle rode bloedcellen gevormd, zoals een muntstuk zuilen, er zijn geen onbekende pathogenen.

Reactie van hemagglutinatie inhibitie (HAI)

Deze zeer specifieke reactie, waardoor de vorm, type virus of de aanwezigheid van specifieke antilichamen in het serum van het bloed van de patiënt vast te stellen.

De essentie ligt in het feit dat de antilichamen toegevoegd aan de buis met het monster voorkomt afzetting van antigenen op erytrocyten, waardoor hemagglutinatie stoppen. Dit is een kwalitatieve indicatie van de aanwezigheid van specifieke antigenen in bloed een bepaalde gewenste virus.

Reactie immunofluorescentie (RIF)

De reactie is gebaseerd op het vermogen om complexen met AT-AH fluorescentiemicroscopie identificeren na behandeling flyuorohromnymi kleurstoffen. Deze methode is eenvoudig te gebruiken, is de isolatie van zuivere cultuur niet nodig en kost weinig tijd. Het is onmisbaar voor de snelle diagnostiek van infectieziekten.

In de praktijk worden deze serologische tests verdeeld in twee categorieën: directe en indirecte.

Direct RIF geproduceerd antigeen dat fluorescent eerder serum verwerkt. En indirecte is dat het geneesmiddel eerst wordt behandeld met gebruikelijke diagnosticum die antilichamen tegen het gewenste antigeen en vervolgens opnieuw aangebracht fluorescerende wei, die specifiek zijn voor de eiwitten van het complex K-AT, en microbiële cellen zichtbaar door microscopie.