Ploskireva medium (Bacto-agar F): Beschrijving. medische microbiologie

Ploskireva medium (hierna steeds Bacto agar F) is een voedingsbodem voor het kweken van bepaalde micro-organismen, vooral Shigella en Salmonella. Als bron voor haar gebruik besmette materialen: urine, gal, feces.

verhaal

Nikolay Ivanovich Ploskirev - Sovjet-microbioloog en geëerd arts. Hij werd geboren in 1869 en stierf in 1948, nadat het grootste deel van zijn leven werkte in zijn woonplaats - Tomsk.

In 1888, hij, de toekomstige wetenschapper, zonder het invullen van de zesde klas van de school, bij het leger. hij in staat om de opleiding te voltooien alleen in 1892 was, dan is geslaagd voor de examens voor toelating tot de Keizerlijke Tomsk University, studeerde hij aan de Faculteit der Geneeskunde. In 1898 ontving hij de titel van doctor.

Ploskirev deelgenomen in het Russisch-Japanse oorlog, en na het werkte in de Tomsk ziekenhuis. In 1910 werd hij benoemd in de functie van hoofd van de dermatologische en venerische ziekenhuis Tomsk, en dertig jaar heeft haar vaste hoofd geweest. Dezelfde wetenschapper was één van de grondleggers van de soa-polikliniek in Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev schreef een reeks werken gewijd aan de bestrijding van geslachtsziekten.

structuur

Woensdag Ploskireva - materiaal voor de teelt van darmbacteriën en daarom moeten verschillende soorten voedingsstoffen bevatten. Het wordt in droge vorm.

Een vrij groot deel van het totale gewicht pancreatische hydrolysaat sprat (10,4 g / l). Iets minder goed voor hydrocitrate dibasisch natriumfosfaat (8,5 g / l). Ook is er een droge voedingsbodem en melksuiker (8,62 en 7,3 g / l).

De tweede titel Ploskireva medium - J. Bacto-agar in het preparaat aanwezig is in een hoeveelheid agar, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo watervrij natriumsulfaat-gehalte van 5,1 g / l. Er is de aanwezigheid van watervrij dinatriumfosfaat - 2,1 g / l, natriumzouten van cholinezuur ongeveer 3,46 g / l natriumcarbonaat en - 2,4 g

Minder dan een gram daarin indicatoren - neutraal rood (0,05) en briljantzuurgroen (0,0002). Het jodiumgehalte - 0,13.

toepassing

De studie van de biochemische processen van bacteriën speelt een zeer belangrijke rol bij de diagnose van ziekten die anaërobe organismen veroorzaken. Species in deze familie - honderden. Ze zijn bijna identiek in morfologie en culturele eigenschappen en meest betrouwbare manier om ze te onderscheiden van elkaar - is de studie van de biochemie.

De studie begint met het inenten van pathologisch materiaal in het kweekmedium. Ze pathologische differentieel voor colibacteriën en een deel van het, in aanvulling op de gewone agar, bestaat uit lichte en lactose. Verwerking vermogen van lactose - een belangrijk teken van differentiatie van enterobacteriën. Als dit wordt ontdekt, de pH verschuift in de richting van de zuurgraad en de indicator is geactiveerd, die de kolonie draait.

Andere landen kunnen andere voedingsstoffen media gebruiken, maar hun werkingsmechanisme komt overeen met de drie meest voorkomende in Rusland - deze omgeving Endo en Levine Ploskireva woensdag.

Beschrijving van de werkwijze

Buitenland Ploskireva analoge medium een zogenaamde MacConkey Agar. In eindproduct transparante oplossing heeft een roze-gele kleur. Kolonies staat zijn om lactose te verwerken, onder Ploskireva geven rode (cranberry) kleur. Als de bacteriën niet kan verwerken of kolonie kleurloos of een zwakke kleur.

Aangezien de samenstelling van het medium omvat stoffen Ploskireva remmers (brilliant groen, galzouten, jood), wordt vrijwel volledig remt de groei van gram-positieve flora, zoals in de eerste dagen eshehiry significant de groei, alsmede andere gebruikelijke bijkomende microflora vertraagt.

tweede been

Verder van belang is de selectie van de kolonie, en het wordt gezaaid op een primair opslagmedium en differentiatie. Omgeving waarin er zaaien moet meerdere substraten bevatten. Bacteriekweek moet enzymactiviteit te detecteren met betrekking tot hen naar hetzelfde medium geplaatst in de buizen zodat er twee plaatsen:

• een waarin de schuine agar;
• met een kolom.

De belangstelling van onderzoekers in de kolonie bevolkt afschuining dichte beroerte en in een kolom - een prik. In dit stadium, het gebruikte medium Russell, Kligler of Olkenitskogo. Zoals differentiële diagnose gebruikt en Ploskireva woensdag.

Microbiologie en pathogene organismen

Agar Ploskireva is een belangrijke factor bij het opsporen van infecties veroorzaakt door Enterobacteriaceae. Dus, bijvoorbeeld, is het uitgegroeid en gedifferentieerde kolonies van micro-organismen die bacillaire dysenterie veroorzaken. Deze anaërobe organismen die behoren tot het geslacht Schigella.

Net als iedereen die deel uitmaakt van een familie van darmbacteriën, Shigella hebben de vorm van staven, de grootte van twee micrometer. Zij vormen geen capsules en sporen hebben flagella - het hen in staat stelt om te worden onderscheiden van Salmonella, die op hun beurt, zijn mobiel. Ze groeien goed op eenvoudigste medium, bij een temperatuur iets boven de omgevingstemperatuur (35-37 ° C) en 7,4 pH. Door de aard van de groei, weet kolonies niet afwijken van Salmonella.

Zoals hierboven besproken, kunnen micro-organismen nagenoeg morfologische verschillen echter sterk verschillen in biochemische processen van het leven. Dus behalve Shigella Nyukestl, zonder de vorming van zure gassen optreedt tijdens fermentatie van koolhydraten. Met uitzondering van Shigella sonnei, kunnen ze niet lactose te fermenteren, maar wordt verteerd glucose. Gewoon om hun belangrijkste functies, kunt u ze uit te voeren wat ze kunnen om niraty reduceren tot nitriet. Hun kolonies werden geknipt met ureum, evenals in het kweekmedium is geen vloeibaar maken van gelatine.

Het verzamelen en voorbereiding van zaad

Om agenten van dysenterie te sporen, zijn verplicht microbiologisch onderzoek besmet omgevingen, namelijk feces patiënt. Na ontvangst van het materiaal, moet je zo snel mogelijk aan het zaaien doen. fosfaatbuffer mengsel of glycerol - indien dit niet mogelijk is, moet de bron een conserveermiddel worden geplaatst. Bij 4 ° C, kunnen ze worden opgeslagen voor meer dan een dag. Verzamel het materiaal moet door middel van een rectale glazen buis die in het rectum ingebracht worden uitgevoerd.

Voor studies van een materiaal gekozen purulente mucus stukken te wassen in twee tot drie buisjes isotone natriumchlorideoplossing.

Toepassing van pathogene bacteriën in het milieu Ploskireva vervaardigde glazen spatel. U moet wrijven op een klein deel van zijn agar, dan scheurt u de spatel op het milieu en het restmateriaal wordt gewreven in de ingezaaide oppervlakte. Als het zaaien gebeurt in een paar kopjes, vervolgens aan elk van hen nodig hebben om een nieuwe partij te planten.

Als muco-purulent stukken er in te nemen op een speciale analyse, maar dat betekent niet dat er geen aanwezigheid van ziekteverwekkers. In een dergelijk geval is het noodzakelijk om ontlasting te emulgeren in 10 ml natriumchloride (concentratie 0,85%) en daarna zaaien één of twee druppels op een medium Ploskireva. Niet-geëmulgeerde stoel kan worden gezaaid in selenitovy bouillon. Hij ook gebruikt, indien, in plaats van de uitwerpselen zijn braaksel of wasbeurten.

microbiologische diagnose

In de eerste fase van microbiologisch onderzoek zaaien van pathogene bacteriën in twee kopjes uitgevoerd, dan om te zien hoe om te groeien Shigella. Op woensdag geproduceerd Ploskireva een gewas, en de tweede - op het milieu of Endo Levin.

Vanwege het feit dat er spanningen van Shigella resistent zijn tegen antibiotica, aan het medium werd verrijkt met chloramfenicol. Vervolgens treedt binnen dagen incubatie in een incubator bij 37 ° C

Op de tweede dag van de volwassen kolonies te verkennen. Degenen die niet op de differentiële diagnose medium gegroeid kleurloos, is het noodzakelijk om onkruid uit middellange of korte Russell's "bonte rij." Verder onderzoek wordt uitgevoerd door het algoritme van de belangrijkste gewassen op hen. Kolonies van Shigella woensdag Ploskireva groeien in de vorm van transparante, kleurloze en kleine kolommen. Ze zijn twee soorten:

• afgevlakt met gekartelde randen;
• rond, convex, met een typische natte glans.

Drie of vier kolonies moet worden mikroskopirovat en onderzocht op mobiliteit. Indien dit laatste niet komt opdagen, verhuisde ze op woensdag Olkenitskogo een zuivere cultuur te isoleren. Bij het ontbreken van karakteristieke kolonies Shigella of als er geen groei meer wordt waargenomen, is het noodzakelijk om Endo agar of Ploskireva produceren zaaien van selenitovogo bouillon. Als de typische kolonies aanwezig in voldoende aantallen zijn, zet de geschatte agglutinatie. Een mengsel van sera sonnei en Flexner, reactie plaats op het glas.

verder onderzoek

Op de derde dag zijn er veranderingen die hebben plaatsgevonden in de kolonies op het medium Russell's. Als er een cultuur die niet de lactose wordt afgebroken en glucose vergist tot een zuur te produceren, wordt gescheiden en geanalyseerd, besteden microscopie, evenals het uitvoeren van zaaien in de "bonte rij," maar deze keer uitgebreid. Gewoon de agglutinatiereactie, om serologische identificatie.

Op de laatste dag, kan worden geconcludeerd op basis van veranderingen in de "bonte nummer" (als er fermentatie van koolhydraten), en vat de agglutinatiereactie.

Opslag en voorbereiding

Bereiding van agar Ploskireva vindt als volgt plaats:

1. 55 g droge stof wordt geroerd in een liter gedestilleerd water.
2. Gekookt gedurende twee tot drie minuten totdat de agar is nog niet volledig gesmolten.
3. Giet in petrischalen (steriliteit optioneel) laag van 5-6 mm.
4. De platen worden opengelaten voor een half uur bij kamertemperatuur (18-25 °). Hierna werd het medium voldoende uitharden en drogen.

Woensdag Ploskireva lichtgevoelige en hygroscopisch. Het poeder moet worden opgeslagen in een afgedichte verpakking moet de relatieve luchtvochtigheid in de ruimte niet meer dan 60%. De optimale temperatuur voor de opslag van 2 ° C tot 25 ° C De opslag moet voldoen aan deze regels, anders mogelijk onjuist bevindingen.